Anti-COX
IV抗體(鼠單抗)
Anti-COX IV Antibody(Monoclonal Antibody from Mouse)
產(chǎn)品編號
|
產(chǎn)品名稱
|
規(guī)格
|
RGC2030
|
Anti-COX IV抗體(鼠單抗)
|
20 μl
|
● 產(chǎn)品簡介
來源
|
用途及稀釋比例
|
抗體類型
|
COX IV分子量
|
Mouse
|
WB 1:5000-10000
IHC 1:200-1000
IF 1:200-1000
|
單克隆抗體
|
~17 kD
|
注:WB, Western blot; IP, Immunoprecipitation; IF,
Immunofluorescence
COX IV抗體用經(jīng)過適當修飾的人工合成COX IV一段多肽作為抗原制備而成的抗COX IV小鼠單克隆抗體。本抗體在Western blot或免疫染色時僅識別COX IV。COX IV抗體可用作線粒體蛋白上樣量的內(nèi)參。
真核細胞中的細胞色素C氧化酶(Cytochrome C Oxidase,簡稱COX)是一種異源寡聚酶,通常含有13個亞基,定位于線粒體內(nèi)膜,是線粒體呼吸鏈的酶復合物,它可以從每4個還原性的細胞色素C得到一個電子,傳遞給一個氧分子,最終把一個氧分子轉(zhuǎn)變成兩個水分子。在此過程中細胞色素C氧化酶會結(jié)合4個質(zhì)子用于產(chǎn)生2個水分子,同時把4個質(zhì)子轉(zhuǎn)移到膜的另外一側(cè)產(chǎn)生質(zhì)子梯度,即建立跨膜的電化學勢,隨后ATP合成酶可以利于該電化學勢合成ATP。細胞色素C氧化酶中構(gòu)成催化中心的3個最大的亞基由線粒體DNA編碼,其余10個亞基包括COX IV由細胞核內(nèi)的基因組DNA編碼。細胞色素C氧化酶活性缺陷和人類多種疾病相關。
本抗體如果用于常規(guī)的Western檢測,至少可以檢測20次。
● 貯存形式:
1 mg/ml抗體溶于PBS,50%甘油,pH7.2。
● 保存及運輸條件:
-20℃保存,一年有效;避免反復凍融;濕冰運輸。
● 使用說明:
1. Western Blot雜交(ECL顯色):1:1000-5000稀釋,常溫孵育1-2 h或4℃過夜。
2. 免疫熒光(IF)和免疫組化(IHC):1:200-1000稀釋。
● 實驗示例:
K562懸浮細胞膜蛋白檢測
樣品:TP為RIPA提取總蛋白做對照;CY為膜蛋白提取上清-胞漿蛋白;M為使用不同去垢劑提取的膜蛋白
電泳:4-18% RealPAGE PrecastGel,樣品使用5×速溶性上樣緩沖液配成0.5μg/μl,37度30min后上樣,上樣體積為10μl和20μl,
轉(zhuǎn)膜:0.45μm PVDF膜,1×RealBlot濕轉(zhuǎn) 400mA 35min。
封閉:快速封閉液 RT 10 min
一抗:ATPase兔單抗 1:5000 O/N;
GAPDH兔多抗 1:3000 O/N;
COX
IV鼠單抗 1:5000
O/N。
二抗:羊抗鼠IgG-HRP(貨號:HGM1060) 1:5000 RT
60min;羊抗兔IgG-HRP(貨號:HGM1020) 1:5000 RT 60min;
檢測:RealECL發(fā)光液(貨號:EC2520)自動曝光1秒
|