單鏈DNA PAGE電泳染色試劑盒
產(chǎn)品編號(hào)
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規(guī)格
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運(yùn)輸
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RTS5103
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20次
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常溫
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● 產(chǎn)品簡(jiǎn)介
單鏈DNA PAGE電泳染色試劑盒(ssDNA PAGE Stain Kit for Nucleic Acids)是一種快速簡(jiǎn)單、可用于尿素-聚丙烯酰胺凝膠中的核酸檢測(cè)的試劑盒。采用新型染色劑,電泳結(jié)束后可以直接染色凝膠,不用借助任何成像儀器,既能觀察核酸條帶。該方法能檢測(cè)到下限10ng的 ssDNA條帶,常用于檢測(cè) SSR 標(biāo)記、SNP 標(biāo)記等。
按照每次使用50 ml染色液計(jì)算,本試劑盒可用于18-20塊常規(guī)的8×10cm凝膠的染色。
● 產(chǎn)品組成:
產(chǎn)品編號(hào)
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產(chǎn)品名稱
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規(guī)格
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貯存
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RTS5103-1
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染色貯存液(10×)
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100 ml
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常溫
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RTS5103-2
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染色緩沖液(5×)
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250 ml
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常溫
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-
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125ml棕色塑料瓶(空)
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-
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● 儲(chǔ)存條件
常溫保存;常溫運(yùn)輸,開封后一年有效。
● 使用方法:
一. 即用型染色液配制:
在125 ml棕色塑料瓶中依次加入以下組份,混勻;即用型染色液常溫貯存。
順序
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組份
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50 ml
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1
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染色貯存液(10×)
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5
ml
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2
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超純水
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35
ml
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3
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染色緩沖液(5×)
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10
ml
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二. 染色步驟:
1. ssDNA PAGE電泳后,凝膠用蒸餾水漂洗1-2次。
2. 加入適量即用型染色液覆蓋凝膠,一般8×10cm凝膠50 ml即可,在搖床上常溫?fù)u動(dòng)15-20分鐘,搖動(dòng)速度為60-70rpm。一般2-5分鐘可以看到條帶。
三. 脫色步驟:
倒掉染色液,加入適量蒸餾水,在搖床上常溫?fù)u動(dòng)15-20分鐘,期間可以更換2-3次蒸餾水;至凝膠背景透明后記錄圖片。
注:1. 染色時(shí)間不要太長(zhǎng),更不能過夜染色。長(zhǎng)時(shí)間染色會(huì)導(dǎo)致ssDNA游離出凝膠,導(dǎo)致膠上無帶。
2. 使用后的染色液收集后,可以重復(fù)使用2-3次
● 實(shí)驗(yàn)示例:
● 常見問題:
1.
背景太深:
a. 顯色時(shí)間過長(zhǎng)。通常凝膠在染色液里2-5分鐘既能看到條帶,顯色反應(yīng)會(huì)在20分鐘內(nèi)結(jié)束,顯色反應(yīng)時(shí)間過長(zhǎng)會(huì)藍(lán)色背景很深。
2. 核酸條帶非常淺:
a. 上樣量太少。 該染色方法可以檢測(cè)到10
ng 單鏈DNA片段,請(qǐng)控制核酸上樣量。
3. 染色方法適合于雙鏈DNA染色嗎?
不適合。雙鏈DNA的分離一般用非變性DNA PAGE電泳,該染色液不能有效染色。